Y2HGold Yeast Strain 酵母雙雜交用甘油菌

產品標簽

Matchmarker GAL4雙雜交系統；Y2HGold；pGBKT7；Y187；pGADT7；AUR1-C；Aureobasidin A （AbA）；金擔子素；

產品信息

產品描述

Y2HGold是GAL4系統酵母雙雜交用實驗菌株，能直接轉化質粒或與MATα型酵母菌株Y187通過接合（mating）操作進行蛋白相互作用驗證或雙雜交文庫篩選和構建。Y2HGold-GAL4酵母雙雜交系統需要兩種質粒配套使用，分別為pGBKT7和pGADT7。前者篩選標志為Trp，用于表達DNA-BD與誘餌蛋白（bait）的融合蛋白；后者篩選標志為Leu，用于表達AD與誘捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y2HGold有四個報告基因：AUR1-C，HIS3, ADE2, MEL1，分別由三個*異源的Gal4反應啟動元件-G1，G2，M1調控，這三種啟動子只有GAL4識別的17bp核心區相同，其余部分都不同。這一特征有效縮減假陽性發生的概率。因為，任何誘捕蛋白單獨結合引起假陽性都需要識別3個不同序列，激活4個報告基因表達。另外，新報告基因AUR1-C與以往的營養缺陷報告基因相比，其篩選抗生素-金擔子素（Aureobasidin A，AbA）可以有效殺死非抗性克隆，大大降低背景克隆的生長。具有更低背景，這一優勢也可降低酵母雙雜交假陽性發生的概率。

基因型

MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1_UAS^-Gal1_TATA^-His3, GAL2_UAS^- Gal2_TATA^-Ade2 URA3::MEL1_UAS^-Mel1_TATA AUR1-C MEL1

基本信息

培養基：YPDA

培養條件：28℃，YPDA，有氧培養

保存方式：30%甘油，-20℃保存

轉化方式：PEG/LiAC；電激；

基本應用：酵母雙雜交實驗

使用說明

懋康生物提供的各批次質粒菌株發貨前均經過嚴格的多重驗證，如存在質量問題，請在收到產品三個月內通知我司。收到甘油菌后，請及時在固體平板上劃線培養，挑取單菌落接種到液體培養基中，震蕩培養后使用并保存新的甘油菌。

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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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Y2HGold 酵母雙雜交用甘油菌表達分析

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