ROSGreen^TM H₂O₂ Probe 過氧化氫熒光探針

搜索關鍵詞：

Hydrogen Peroxide 過氧化氫；H₂DCFDA (DCFH-DA, DCFH)；BES-H2O2-Ac；APF 氨基苯基熒光素; Mitosox Red;

同義名：

ROSGreen^TM Hydrogen peroxide Probe；ROSGreen^TM Hydrogen peroxide sensor；ROSGreen^TM H₂O₂ sensor；

產品信息

背景需求

過氧化氫（Hydrogen peroxide, H₂O₂）是一種反映氧代謝副產物，用于許多氧化應激相關態的關鍵調節劑，參與人體大量的生理和病理活動，比如哮喘、動脈粥樣硬化、糖尿病血管病變、神經性衰退疾病和唐氏綜合征等，但目前對H₂O₂生成、積累、運輸和功能的分子機制仍了解很少，zui大的限制在于缺乏靈敏且特異性H₂O₂探針，用于活細胞研究。目前能得到的H₂O₂反應性探針的缺陷包括1）來自其他ROS比如過氧亞硝基陰離子（ONOO^-）、過氧化基（ROO•）、超氧化物（•O₂^–）的背景熒光干擾；2）對外源活化酶的需求；3）水缺乏水溶性或不兼容于水溶體系；4）以及紫外區域的激發光譜特征等。

產品描述

本ROSGreen^TM H₂O₂ Probe正是克服以上缺陷開發的一款過氧化氫（H₂O₂）選擇性探針。探針本身無熒光，可見光區域內無吸收峰。一旦接觸H₂O₂，瞬間激發熒光增加并伴隨可見波長吸收帶的生成（Ex/Em= 490/514nm）。因其二元的吸收/發射熒光反應，此探針具有較大的動力學范圍。與相似的ROS比如O₂^–，NO，或OCl^-相比，ROSGreen^TM H₂O₂ Probe對H₂O₂呈現出＞100倍（100-fold）的選擇性。

注意事項

1）   本品的DMSO儲存液需分裝成單次用量后，-20ºC避光保存，避免反復凍融。所有工作液現配現用。

2）   整個操作過程中注意避光。

3）   為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法【詳見懋康內容】

1、   儲存液制備

將低溫保存的產品從冰箱取出，置于室溫回溫至少20min。低速離心3-5min。之后往瓶內加入適量無水DMSO充分溶解配成2~5mM儲存液（比如，1mg ROSGreen^TM H₂O₂ Probe（Mw: ~ 600）加入333μl DMSO，充分溶解混勻后即得到5mM儲存液）。按照單次用量分裝凍存，避免反復凍融，至少3個月穩定。

2、   工作液準備

正式實驗前，或取粉末按照【儲存液制備】用DMSO溶解，或于室溫融化一管DMSO儲存液。

2.1 對于溶液H₂O₂測定，按照2~20μM工作液濃度制備2×工作液，用20mM Hepes緩沖液或其他緩沖液（pH 7.0）稀釋儲存液。工作液現配現用。建議使用5μM終濃度的ROSGreen^TM H₂O₂ Probe，測定溶液體系中H₂O₂濃度。

2.2 對于細胞H₂O₂測定，按照2~20μM工作液濃度制備1×工作液，用含20mM Hepes緩沖液的HBSS，pH 7.0 或PBS稀釋儲存液。工作液現配現用。

3、   上清液H₂O₂測定

4、   活細胞H₂O₂測定

染色示例

圖1. Costar 黑色96孔培養板內CHO-K1活細胞用ROSGreen^TM H₂O₂ Probe的染色圖。圖A：對照細胞；圖B：用H₂O₂（100μM）處理5min后的細胞；

相關產品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

ROSGreen H2O2 Probe 過氧化氫熒光探針 ROSGreen H2O2 Probe 過氧化氫熒光探針 ?