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Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍 細胞增殖

Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍 細胞增殖

簡要描述:

Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍 細胞增殖Calcein, AM,中文名鈣黃綠素乙酰甲酯,CAS NO:148504-34-1,一種具細胞膜滲透性zui受huan迎的活細胞熒光染料,用來標記和監測活細胞功能,呈綠色熒光(Ex/Em= 490nm/515nm)。

產品時間:2024-07-16

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Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍(藍色)


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產品關鍵詞:

Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍;Calcein, AM 鈣黃綠素;Calcein Red鈣黃綠素紅;DAPI;活細胞染色探針; CAS NO:168482-84-6;


產品信息                                                                                    

產品名稱

產品編號             

規格               

價格(元)       

Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍(藍色)   

MX3015-1MG

1mg

1315

【溫馨提示】:見我司懋康生物(maokangbio)整理的Calcein 鈣黃綠素(常用的活細胞熒光探針)專題


產品描述

Calcein, AM,中文名鈣黃綠素乙酰甲酯,CAS NO:148504-34-1,一種具細胞膜滲透性zui受huan迎的活細胞熒光染料,用來標記和監測活細胞功能,呈綠色熒光(Ex/Em= 490nm/515nm)。然而,Calcein, AM單一顏色使其不能將其用在多重標記實驗,比如,其無法和GFP轉染細胞聯合使用,因光譜一致。為了解決這一應用缺陷,我司特別開發出Calcein Blue, AM、Calcein Red, AM等,實現聯合Calcein, AM對活細胞的多重標記和功能分析。


Calcein Blue, AM本身僅呈微弱熒光(Ex/Em~322/435nm),具有細胞膜滲透性。一旦進入細胞后,被細胞內酯酶水解為鈣黃綠素藍(Calcein Blue),探針極性增強并能保留在細胞內數小時,此時熒光強度增強且熒光光譜遷移到更長波長(Ex/Em~360/445nm),光譜特征類似于DAPI、Hoechst 33342或Hoechst 33258。


產品特性

1)   CAS NO:168482-84-6

2)   化學名:N-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-N-[(7-hydroxy-4-methyl-2-oxo-2H-1-benzopyran-8-yl) methyl]-glycine, (acetyloxy)methyl ester

3)   同義名:Calcein Blue Acetoxymethyl ester鈣黃綠素藍乙酰氧基甲酯;

4)   分子式:C21H23NO11

5)   分子量:465.41

6)   純度:≥90%

7)   Ex/Em:360/445nm

8)   溶解性:溶于DMSO(1~5mM)

9)   化學結構式: Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍 細胞增殖


保存與運輸方法

保存:-20℃避光干燥保存,至少一年有效。

運輸:冰袋運輸。


注意事項

1)   熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

2)   乙酰氧基甲基酯(AM)易吸潮,冰箱取出后請在干燥的環境放至室溫后再開封。由于試劑微量,開封前請將其短暫離心,以保證粉末落入管底。

3)   Calcein Blue, AM對濕度非常敏感,粉末保存一定要保持干燥。Calcein Blue, AM儲存液需要分裝避光凍存,且必須緊緊密封蓋子,干燥保存。Calcein Blue, AM工作液必須現配現用。

4)   為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


使用方法

A, 儲存液制備

儲存液配制范圍可為1~5 mM,具體根據工作濃度來決定,建議提前配制成1000×儲存液。若使用的工作液為5μM,那么可配制5mM的儲存液,即往1mg Calcein Blue, AM(Mw:465.41)內加入430μl 細胞培養級別的DMSO(貨號:MS4601A-100ML),充分溶解,混勻。儲存液根據單次用量分裝-20℃保存,避免反復凍融,數月穩定(不要超過6個月)。 


B, 20% Pluronic F-127制備【可選】

稱取100mg Pluronic F-127粉末(貨號:MS4301-100MG)中加入500μl DMSO,配制成20%(w/v) DMSO母液。溶解過程需要在40-50℃加熱20-30min。溶液室溫保存,不用冷藏。如有結晶析出,可以重新加熱后溶解,不影響使用。 


C, 染色步驟

大多數實驗體系中Calcein Blue, AM的工作濃度為2-5μM。由于不同細胞系的染色條件不同,初次實驗建議做梯度實驗,以確定Calcein Blue, AM的工作濃度,以zui低的探針濃度得到zuihao的熒光結果為篩選原則。

1)   取一管適量分裝的儲存液(1000×)置于室溫,至少回溫20min,低速離心后,用合適的緩沖液如PBS,HBSS-HEPES稀釋到1×染色工作液。

【注意】:有時可添加一定量的非離子表面活性劑如Pluronic F127到Calcein Blue, AM儲存液內來增強其水溶性。制備染色工作液前,取一管Calcein Blue, AM儲存液內加入等體積的20% Pluronic F127,使Pluronic F127的終濃度為0.02%。加入Pluronic F127的Calcein Blue, AM溶液不可長期保存,需現配現用。

2)   對于貼壁細胞,先用yi酶-EDTA或Accutase消化細胞,離心收集細胞(1000 rpm,3min)。對于懸浮細胞,直接離心收集細胞。【注意】:貼壁細胞也可進行原位染色。

3)   去上清,用PBS(或者其他緩沖液)清洗細胞2~3次,以充分去除殘留的酯酶活性。

4)   用1/10細胞培養基體積的Calcein Blue, AM染色工作液重懸細胞,37℃孵育20min~1h。

【注意】:1)若細胞自身含有機陰離子轉運體,需加入丙huang舒(1-2.5mM)或者苯磺唑酮(0.1-0.25mM)到孵育體系內以降低去酯化的Calcein Blue泄露到胞外;2)降低探針加載溫度,可能會減少探針區室化現象。

5)   用PBS(或者其他緩沖液)洗滌細胞兩次去除多余染料。

【注意】:如有必要,使用含有機陰離子轉運抑制劑的緩沖液來進行細胞清洗。

6)   用含合適濾光片(Ex/Em=360/445nm)的儀器進行檢測。


相關產品

貨號

名稱

規格                 

Ex/Em           

MX3011-50UG      

Calcein AM, Ultra Pure Grade 鈣黃綠素(綠色)

50μg

490/515nm

MX3013-1MG

Calcein Red, AM 鈣黃綠素紅(紅色)

1mg

560/574nm

MX3014-1MG

Calcein Deep Red Acetate 鈣黃綠素深紅醋酸鹽    

1mg

646/659nm

MX3015-1MG

Calcein Blue, AM 鈣黃綠素藍(藍色)

1mg

360/445nm

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

 

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

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